大鼠腦缺血再灌注損傷模型步驟

大鼠腦缺血再灌注損傷模型

模型：

麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內(nèi)動脈，用無菌縫合線結(jié)扎，血管夾夾住頸內(nèi)動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2 h后，大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標準：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分，48小時內(nèi)沒有死亡，就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。

優(yōu)點：

無需開顱，創(chuàng)傷較小；缺血部位相對固定，可控性好；可實現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。

動物選擇：

目前多選用SD大鼠。考慮大鼠雌激素水平對腦缺血損傷可能的神經(jīng)保護機制及激素水平的生理性波動對大鼠情緒的影響，采用血管解剖結(jié)構(gòu)更為清晰的雄性SD大鼠作為MCAO的動物模型。

體重和鼠齡：

大鼠大腦中動脈的長度和粗細與其體重形成正比，目前多主張大鼠體重控制在250～300 g。我們在實驗中采用240～270 g大鼠。

術(shù)后再灌：

選擇缺血后2h再灌注，在大鼠體外傷口縫合處找到線頭，輕輕拔出線栓 2～3 cm 剪斷，若此時大鼠已*清醒，可注射少量麻醉后再將線栓拔出，以防拔線栓時大鼠過度掙扎加大損傷。

術(shù)后護理與并發(fā)癥：

術(shù)后將大鼠放回鼠籠、保溫，期間可將大鼠頭部微微墊高，以防側(cè)枝循環(huán)過快恢復。

MCAO模型評價方法：

神經(jīng)功能評分、TTC 染色、腦組織含水量、局部腦血流測定和頭顱磁共振等。

神經(jīng)功能評分：Bederson 評分

   0分：無神經(jīng)損傷癥狀

   1分：懸尾實驗不能*伸展對側(cè)前爪

   2分：前肢抵抗對側(cè)推力能力下降

   3分：向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈

注意事項：

00001. 線栓插入深度為從頸總動脈分叉處插入約 18 mm，即將線栓送入頸內(nèi)動脈后，黑色標記點過分叉點約 1 mm，感覺稍有阻力時即停止插入。

00002. 線栓插入位置和走向：頸總動脈插入。結(jié)扎頸總動脈近心端，遠心端掛線備用，結(jié)扎頸外動脈，頸內(nèi)動脈系活結(jié)或動脈夾夾住。