細(xì)胞免疫組化

1. 對于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。

2. 如果細(xì)胞貼得不牢，可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。

3. 用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘，用PBS洗滌一次。

4. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液，室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗；

5. 滴加正常山羊血清封閉液，室溫30分鐘，甩去多余液體；

6. 滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃過夜），然后PBS充分淋洗；

7. 滴加兔/鼠二抗工作液，室溫孵育1h，PBS充分淋洗；

8. DAB顯色5-10分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度 ；

9. PBS或自來水沖洗1分鐘 ；

10. 蘇木精復(fù)染3分鐘，鹽酸酒精分化,反藍(lán)；

11. 自來水沖洗1分鐘 脫水、透明、封片、鏡檢。