實驗性胃潰瘍模型的建立與防治

【實驗目的】

1. 學習大鼠胃潰瘍(gastric ulcer)模型建立的方法。

2． 觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。

3． 了解組織切片和HE染色方法。

【實驗原理】

消化性潰瘍(peptic ulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下，機體有胃黏液、胃黏膜屏障（mucosal barrier）、黏膜細胞更新以及胃、十二指腸節律性運動功能等一系列保護性機理，使胃、腸黏膜不受損傷。但過度的精神緊張、情緒激動，會使神經系統和內分泌功能紊亂；飲食失調，如粗糙食物，骨刺等對黏膜的物理性損害；刺激性食物，如過酸、辛辣食物、酒精等；服用某些藥物，如阿司匹林、消炎痛、利血平等；不規則的進食時間和細菌等等都可引起胃黏膜損傷和胃液分泌功能的失常。導致潰瘍產生。酒精可刺激胃酸分泌，對胃黏膜也有直接損傷作用，短期攝入大量酒精可引起胃黏膜的損傷而產生潰瘍。本實驗建立酒精性胃潰瘍模型，并選用藥物進行治療，從而分析潰瘍產生的機制及防治作用。

【實驗對象】

大鼠10只（雌雄不拘，體重200～250g）。

【實驗試劑與器材】

1. 器材　大鼠手術臺、哺乳動物手術器械一套、注射器、塑料管等。

2. 試劑和藥品　*、氫氧化鋁凝膠（1%）、洛賽克、甲氰咪胍注射液、1%甲醛溶液、生理鹽水、切片機、HE染色液一套。

【實驗方法與步驟】

1. 將200～250g大鼠10只(雌雄不拘)分籠飼料，禁食48h，自由飲水。

2. 手術　麻醉后將大鼠固定于手術板上，自劍突下剪開腹壁，用扁平頭的鑷子將肝臟內側的胃拉出腹腔，用手術線在幽門和十二指腸的交界處做結扎。然后將胃放回原位，縫合腹部。將一外徑2.5mm，長10cm左右的塑料管經口插入胃中。

3. 分組給藥　隨機將大鼠分成5組，每組2只。A組灌喂氫氧化鋁凝膠5ml/只，B組皮下注射甲氰咪胍注射液25mg/100g體重，C組灌喂洛賽克，D組灌生理鹽水為陰性對照組，E組灌生理鹽水為陽性對照組。

4. 建立潰瘍模型　除D組外，其余各組均于給藥后，接著再灌入1ml無水乙醇，取出塑料管，將大鼠放入籠內。

5. 解剖　術后2h將大鼠用頸椎脫臼法處死。剪開腹壁縫線，結扎賁門，取出胃，沿胃大彎將胃剪開，用自來水沖洗干凈內容物后平展于玻璃板上。

6. 切片及HE染色（方法見第二十章第五節）。

【觀察項目】

1. 計數　用小方格（2mm×2mm）的計數板，測定實驗組和對照組胃黏膜的總面積、潰瘍面積及潰瘍的數目。計算出每只大鼠潰瘍面積占胃黏膜總面積的百分比。將實驗結果計入自行設計的表格中。

2. 切片觀察　觀察組織切片，并將實驗組和對照組的組織損傷程度進行比較。

【注意事項】

1. 術前饑餓是為了使大鼠排空胃內容物，應將大鼠關在架空的鐵絲籠中，防其吃糞粒與鋪墊物。

2. 塑料導管插入時一定要輕，不能用力過猛而戳破食道。

3. 用鑷子翻動、夾取胃部時，動做要輕柔，以免器官組織受損。

4. 做手術中，為了防止大鼠清醒，可在大鼠鼻旁放少量棉球進行麻醉。