咨詢熱線(微信同號)

      18017847121

      當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細胞凋亡誘導技術(shù)

      細胞凋亡誘導技術(shù)

      更新時間:2022-05-19      點擊次數(shù):3050

      【實驗方法與步驟】

        1)細胞凋亡的誘導:HeLa細胞常規(guī)傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期(見細胞傳代培養(yǎng))。實驗組細胞加入順鉑溶液(生理鹽水配置)至終濃度為20μmo1/L,37℃,5% CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)。空白實驗對照加入等體積的生理鹽水,同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)。24h后進行染色及形態(tài)學觀察。

        2)胰酶消化細胞,將培養(yǎng)基上清及消化下來的細胞一同轉(zhuǎn)入離心管中600~800r/min離心10min。

        3)吸去上清,用1mL PBS重懸細胞沉淀,并轉(zhuǎn)入1.5mL微量離心管中,600~800r/min離心10min。

        4)吸去上清,用500μL PBS重量細胞沉淀,取178μL轉(zhuǎn)入0.5mL的微量離心管中,加入PI 20μL(終濃度100μg/mL),Hoechest 33342 2μL(終濃度10μg/mL),混勻,37℃溫箱中避光標記15min

        5600~800r/min離心10min,棄上清,加50μL PBS重懸細胞。

        6)分別從實驗組及對照組中取10μL細胞懸液滴于載玻片上,蓋上蓋玻片。

        7)熒光顯微鏡20倍物鏡在紫外光激發(fā)下觀察,可觀察到凋亡細胞核形態(tài)發(fā)生明顯的改變,出現(xiàn)染色質(zhì)凝集及邊緣化。


        【注意事項】

        1)誘導細胞凋亡后收集細胞時,注意要同時收集細胞培養(yǎng)基上清液。

        2)懸浮細胞時動作要輕柔,避免損傷細胞。

        3)在實驗中可同時設(shè)計壞死細胞的對照,例如,取正常細胞經(jīng)低滲后進行染色觀察。


      上海達為科生物科技有限公司
      • 聯(lián)系人:張
      • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區(qū)B637室
      • 郵箱:2844970554@qq.com
      • 傳真:
      關(guān)注我們

      歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息

      掃一掃
      關(guān)注我們
      版權(quán)所有©2025上海達為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:143011
      管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
      主站蜘蛛池模板: 亚洲天堂成人网| 成人三级k8经典网| 国产精品成人第一区| 国产成人高清在线播放| 亚洲av成人片在线观看| 久久青青成人亚洲精品| 成人欧美一区二区三区在线| 国产成人在线观看网站| 69国产成人精品视频软件| 国产成人黄网址在线视频| www亚洲欲色成人久久精品| 成人免费av一区二区三区| 亚洲伊人成人网| 国产成人精品一区二三区在线观看 | 国产精品成人va在线观看入口| 国产国产成人久久精品杨幂| 欧美成人精品第一区二区三区| 国产成人小视频| 成人午夜精品无码区久久| 久久亚洲精品成人777大小说| 国产精品成人va在线播放| 欧美成人全部免费观看1314色| 亚洲欧美成人中文在线网站| 国产成人综合欧美精品久久 | 成人毛片18女人毛片免费视频未| 久久青青成人亚洲精品| 国产成人免费a在线资源| 成人在线免费视频| 成人激情免费视频| 成人毛片18女人毛片免费视频未| 欧美成人怡红院在线观看| 亚洲av成人片在线观看 | 国产成人精品久久综合| 成人h动漫精品一区二区无码| 日本在线高清视频日本在线观看成人小视频 | 亚洲成人黄色网址| 亚洲精品国产成人中文| 亚洲精品亚洲人成人网| 依依成人精品视频在线观看| 四虎www成人影院| 国产69久久精品成人看|