HE染色實驗的詳細步驟：從樣本制備到結果觀察

　　HE染色實驗是生物醫(yī)學中常用的一種染色技術，尤其在病理學、組織學和胚胎學等領域具有廣泛應用。其HE染色通過利用蘇木精和伊紅兩種染料的酸堿性質(zhì)，將組織切片中的細胞核和細胞質(zhì)分別染成藍色和紅色，從而清晰地顯示出組織或細胞的形態(tài)結構。蘇木精是一種堿性染料，能將細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)內(nèi)的核酸染成藍紫色；而伊紅是一種酸性染料，能使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分染成紅色。這種染色方法不僅簡單易行，而且染色效果穩(wěn)定，適用于各種固定液固定的材料，染色后不易褪色，可長期保存。

　　HE染色實驗的步驟主要包括脫蠟、染色、脫水和封片等環(huán)節(jié)。下面將詳細介紹這些步驟：

　　1、樣品制備

　　固定：對于貼壁生長細胞，胰酶消化后調(diào)整細胞濃度并滴加于蓋玻片上，培養(yǎng)相應時間后取出細胞爬片，用PBS洗滌。

　　固定液處理：使用95%乙醇固定20分鐘，然后用PBS洗滌。

　　2、蘇木素染細胞核

　　染色：切片入Harris蘇木素染液中染色3-8分鐘，自來水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來水沖洗，0.6%氨水返藍，流水沖洗。

　　分色：若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。

　　3、伊紅染細胞質(zhì)

　　染色：切片入伊紅染液中染色1-3分鐘。

　　4、脫水封片

　　脫水：將切片依次放入95%酒精I 5分鐘-95%酒精II 5分鐘-無水乙醇Ⅰ5分鐘-無水乙醇Ⅱ5分鐘-二甲苯Ⅰ5分鐘-二甲苯Ⅱ5分鐘中脫水透明，從二甲苯拿出來稍晾干。

　　封片：中性樹膠封片。

　　5、顯微鏡鏡檢

　　圖像采集分析：在顯微鏡下觀察染色結果，并進行圖像采集和分析。