小鼠胎鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)

1、取懷孕18天小鼠，采用頸椎脫臼法處死，75%乙醇全身浸泡消毒；

2、超凈臺內，無菌條件下取胚胎，放入解剖液中清洗3次；

3、分離海馬腦區(qū)，解剖液沖洗3次；

4、用彈簧剪將海馬剪成1mm³大小，消化液37℃消化15-20min，每五分鐘振蕩一次；

5、去掉上清，加入種植液1終止消化，吹打10-15次，不能有氣泡，70um濾網(wǎng)過濾；

6、計數(shù)；

7、按4 x 10^4 細胞/孔種入24孔板，37℃，5%CO2，95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5h；

8、5h后更換為種植液2繼續(xù)培養(yǎng)；

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