2024年5月9日，周四，公司組織，由實驗室主管劉博主導，實驗室全體成員參與，對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養的相關知識點，進行了培訓與交流。本次會議，主要針對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養，就以下內容展開了交流：

1. 準備0-1天內的C57BL/6J小鼠新生鼠。

2. 用溫的無菌去離子水，輕輕擦拭每只新生鼠。

3. 用70%的乙醇去除新生鼠身體上的污染物。

4. 斷頭，取心臟，心臟置于冰的PBSG溶液中。

5. 除去血液和非心臟組織。

6. 剪碎心臟組織。

7. 加入胰酶-膠原酶消化液，每只新生鼠75ul。

8. 在37°C的搖床培養箱中，以250 rpm/ 5 min，消化心肌組織。

9. 輕輕渦旋，然后離心10秒，丟棄第一次消化的上清液。

10. 開始第二次消化，250 rpm/ 5 min后，輕輕渦旋，然后離心10秒，收集上清液到2倍體積的胎牛血清中。

11. 重復上述消化過程，共進行8次消化，收集細胞懸液。

12. 使用沒有包被的10cm大皿，預種植細胞1h。

13. 1小時后，將培養皿從培養箱中取出，移除沒貼壁的細胞及上清液，加入培養基繼續培養。

本次會議，提升公司對新生小鼠原代心肌成纖維細胞的分離與培養的重要知識點的認知