流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期1。實(shí)驗(yàn)原理用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，通常用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染細(xì)胞核。PI在一定波長(zhǎng)的光下發(fā)出熒光，其強(qiáng)度與DNA含量成正比。通過(guò)流式細(xì)胞儀分析各時(shí)期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，可檢測(cè)細(xì)胞的增殖、凋亡。2。流式細(xì)胞儀檢測(cè)A549細(xì)胞周期步驟收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，計(jì)數(shù)，以(1~5)×105/孔接種于6孔板，置37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)過(guò)夜，使細(xì)胞貼壁。次日更換培養(yǎng)液，各孔分別加入含有0、80、400、2000、10000mg/L不同濃度茶...

1、炎癥灶內(nèi)主要是巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。單核吞噬細(xì)胞的浸潤(rùn)對(duì)慢性炎癥十分重要。單核細(xì)胞從血管游出后轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞還可被激活。在炎癥灶局部巨噬細(xì)胞的積聚有三方面的原因：①由于從炎癥灶不斷產(chǎn)生吸引單核細(xì)胞的趨化因子，如C5a、纖維蛋白多肽、陽(yáng)離子蛋白質(zhì)及膠原和纖維粘連蛋白的分解產(chǎn)物等。因此，從血液循環(huán)中滲出的單核細(xì)胞源源不斷來(lái)到局部，這是局部巨噬細(xì)胞的主要來(lái)源。②游出的巨噬細(xì)胞在局部通過(guò)有絲分裂而增殖，但巨噬細(xì)胞局部增殖的起始動(dòng)因還不清楚。③炎癥灶內(nèi)的巨噬細(xì)胞...

激光掃描共聚焦顯微鏡可測(cè)定的樣品種類很多．包括生物材料、組織(切片)、細(xì)胞(亞細(xì)胞)結(jié)構(gòu)等。樣品中熒光的來(lái)源主要有如下幾種：自發(fā)熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、誘發(fā)熒光(inducedfluorescence)及酶致熒光(enzymaticallyproducedfluorescence)等等。其中大部分熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)均可在儀器自帶軟件的染料信息庫(kù)中找到。1．觀察步驟及儀器操作根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制備樣品完畢后。即可進(jìn)行觀察。基本步驟如...

人非小細(xì)胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立：（1）探討肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和阻斷其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的研究；（2）模擬晚期非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的自然發(fā)生過(guò)程；（3）在活體動(dòng)物的完整器官內(nèi)評(píng)估瘤細(xì)胞播散和腫瘤的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)方法原理將表達(dá)GFP的質(zhì)粒pRNAT-U6/Neo轉(zhuǎn)染人肺腺癌細(xì)胞A549，G418篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)GFP細(xì)胞，對(duì)比轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的生長(zhǎng)活性和成瘤性。將轉(zhuǎn)染后細(xì)胞原位種植裸鼠預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)處死。HE染色和免疫組化檢測(cè)轉(zhuǎn)移灶的位置和數(shù)目。利用KODAKIS2000MM系統(tǒng)檢測(cè)腫瘤播散情況。實(shí)驗(yàn)材...

人胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動(dòng)物模型。腫瘤組織塊原位移植法實(shí)驗(yàn)方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴結(jié)和肝臟等器官轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移率達(dá)66.7%(2/3)，第6周末轉(zhuǎn)移率高達(dá)*(10/10)。實(shí)驗(yàn)材料雄性SPF級(jí)SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901試劑、試劑盒水合氯醛福爾馬林液儀器、耗材飼養(yǎng)籠光學(xué)顯微鏡石蠟實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備1.雄性SPF級(jí)SCID小鼠，...

人胰腺癌裸小鼠模型實(shí)驗(yàn)方法原理將人胰腺癌細(xì)胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測(cè)量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關(guān)臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測(cè)相關(guān)抗原。皮下腫瘤組織細(xì)胞及細(xì)胞株培養(yǎng)，HE染色。實(shí)驗(yàn)材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌細(xì)胞株8988試劑、試劑盒RPMI-1640*培養(yǎng)基胰酶戊二醛儀器、耗材CO2培養(yǎng)箱試管實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備裸小鼠BALB/cnu-nu，4～6周齡，體重16～20g，雌雄兼?zhèn)洌琒PF級(jí)環(huán)境中飼養(yǎng)，恒溫25～27℃，恒濕45...

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實(shí)驗(yàn)步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高PCR產(chǎn)物的特異性，應(yīng)該使用熱啟動(dòng)聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，應(yīng)該在PCR反應(yīng)混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板，選擇的STR標(biāo)記的大小應(yīng)該是78~250bp,因?yàn)檫@些DNA模板...